Здраствуете,
подскажите, если кто сталкивался со следующей проблемой
компилирую проект с опцией в Makefile OPT = 0 все работает,
а с опцией OPT = s,1,2, 3 не работает.
В чем может быть ошибка?

Читайте C:/WinAVR/DOC/AVR-libc/FAQ.html от начала и до конца, потом еще раз раздел, где упоминается слово volatile. Еще помогает просмотр листинга.

Ещё бывают паузы на циклах и нопах, которые могут "оптимизироваться" напрочь...

asm volatile не напрочь